二乙酸荧光素用于生化研究，酯酶底物，用于组织化学检验。荧光基质 ，用作细胞内相互作用及其(细胞)膜渗透性的研究。 FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低，因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。